NATtrol Grippe-Überprüfungspanel (7 x 0,5 ml)
Atemwegsviren tragen wesentlich zur Morbidität und Mortalität in allen Altersgruppen bei . Eine schnelle Identifizierung ist sowohl für therapeutische Zwecke als auch für Zwecke der Infektionskontrolle wichtig. Herkömmliche virale Schnelldiagnosen wie Immunoassays liefern schnelle Ergebnisse und sind einfach durchzuführen; haben jedoch eine suboptimale Empfindlichkeit .
Nucleic Acid Amplification Assays (NAAT), die relativ schnell sind und eine stark erhöhte Empfindlichkeit aufweisen, werden zur Methode der Wahl. In jüngerer Zeit haben weniger komplexe molekulare Plattformen von der Probe zum Ergebnis wie Xpert Flu Assay (Cepheid), RP (BioFire Diagnostics), RV+ (Nanosphere), eSensor Respiratory Viral Panel (GenMark Diagnostic) und Liat Influenza A/B (Iquum) eingesetzt auf dem Markt eingeführt, die das Potenzial haben, Ergebnisse in 1–4 h mit Direktzugriffsfunktionen bereitzustellen . Der Hauptzweck dieser Studie bestand darin, die Leistung von zwei neuen automatisierten Echtzeit-PCR-Systemen mit einem bewährten zuverlässigen Vergleichssystem zu vergleichen .
Ziele
Wir verglichen die Leistung von zwei IVD-zugelassenen RT-PCR-Schnelltests, RV+ und RP, mit den Ergebnissen, die mit Pro erzielt wurden. Beide schnellen Systeme sind hochgradig automatisiert und verfügen über Direktzugriffsfunktionen.
Studiendesign
Klinische Proben
Klinische Proben wurden von 89 Patienten (Altersspanne 45 Tage bis 86 Jahre, Median 7 Jahre, 60 % pädiatrische Fälle) erhalten, bei denen Atemwegsproben (90 % Nasopharynx, 8 % untere Atemwege) oder Stuhlproben (Adenovirus, 2 %) eingereicht wurden den Nachweis von Atemwegsviren und wurden zuvor von Pro als positiv bestimmt. Proben, die zwischen Januar 2008 und Februar 2012 gesammelt und bei –80 °C gelagert wurden, wurden basierend auf den Ergebnissen der ursprünglichen Tests ausgewählt. Die Proben wurden auf unterschiedliche Viren gepaart und als Zwei-Proben-Pools getestet. Abweichende Proben wurden einzeln erneut getestet, während auf Adenovirus abweichende Proben wie zuvor beschrieben durch Viruskultur überprüft wurden [22] . Proben wurden als richtig positiv definiert, wenn sie bei zwei oder mehr Assays positiv waren.
Viren
Das NATtrol™ RVP Verification Panel (ZeptoMetrix, Buffalo, NY) wurde für die Analyse der Nachweisgrenze durch Reihenverdünnung (1:10) in normalem Humanplasma für den Endpunktnachweis verwendet. Virale Nukleinsäurekonzentrationsbestimmungen basierten auf quantifizierter viraler Kontroll-RNA (Hologic Gen-Probe Inc., San Diego, CA) unter Verwendung von Pro.
RV+
Die Verigene Der RV+ Test (Nanosphere, Northbrook, IL) kombiniert herkömmliche PCR mit einem Nachweissystem für Goldnanopartikelsonden. Zunächst wurden Testkartuschen, Extraktionsschalen und Amplifikationsschalen in den Processor SP geladen, nachdem die Amplifikationsschalen 10–30 Minuten lang aufgetaut worden waren. Probe im Virustransport (0,2 ml) wurde auf die Extraktionsschale gegeben. Die automatisierte Probenlysierung und Zielamplifikation von etwa 10 % des Lysats wurde auf dem Verigene Processor SP als Multiplex-Assay zum Nachweis von FluA, 09H1, sH3, sH1, FluB, RSV-A und RSV-B durchgeführt. Innerhalb von 5 Minuten nach Abschluss der Amplifikation wurde die RV+-Testkartusche aus dem Prozessor entfernt, geöffnet, um den Hybridisierungsobjektträger freizugeben, der dann in das Verigene-Lesegerät eingeführt wurde. Die Ergebnisse wurden für jedes Ziel als „erkannt“ oder „nicht erkannt“ gemeldet, oder eine Meldung „No Call“ (NC) wurde im Falle eines Assay-Versagens, wie z. B. eines Versagens einer internen Kontrolle, gemeldet. NC-Proben wurden erneut getestet, um ein gültiges Ergebnis zu erhalten.
RP
Das FilmArray Respiratory Panel v1.6 (BioFire Diagnostics Inc., Salt Lake City, UT), das zum Zeitpunkt der klinischen Bewertung ein umfassendes Panel zum Nachweis von 15 respiratorischen viralen Targets (AdV, Coronaviren [CoV] HKU1 und NL63, FluA, 09H1, sH3, sH1, FluB, hMPV, humanes Rhinovirus/Enterovirus (HRV), PIV1–4 und RSV) durch Echtzeit-PCR. Das geschlossene System integriert Extraktion, Amplifikation und Detektion in einem einfachen, freihändigen Test. Kurz gesagt, 0,3 ml Probe im viralen Transport wurden zu 0,5 ml Probenpuffer gegeben. In den FilmArray-Beutel wurden 0,5 ml Hydratationslösung und 0,3 ml der verdünnten Probe injiziert. Der Beutel wurde in das FilmArray eingeführt und innerhalb von 70 Minuten wurden die Ergebnisse für jedes Ziel als erkannt, nicht erkannt oder ungültig gemeldet. Ungültige Proben wurden erneut getestet, um ein gültiges Ergebnis zu erhalten. Zusätzlich,
Profi
Die Prodesse-Assays für Atemwegsviren (Hologic|Gen-Probe, San Diego, CA) sind eine Reihe von Multiplex- oder Uniplex-Echtzeit-PCR-Assays, einschließlich ProFlu+ (erkennt FluA, FluB und RSV), ProFAST+ (Differenzierung von 09H1, sH3 und sH1), ProAdeno+, ProHMPV+ und ProParaflu+ (unterscheidet PIV1–3). Kurz gesagt, virale RNA wurde aus 0,2 ml Probe im viralen Transport zusammen mit einer universellen internen Kontrolle unter Verwendung von NucliSens Magnetic Extraction Reagents und dem easyMAG-Extraktor (bioMerieux, Durham, NC) extrahiert und auf ein Volumen von 50 μl eluiert. RNA-Extrakt, 5 μl, wurde auf SmartCyclern (Cepheid, Carlsbad, CA) mit dem für klinische Zwecke erforderlichen geeigneten Assay amplifiziert.
NATtrol Flu Verification Panel (7 X 0.5 mL) |
|||
NATFVP-NNS | Zeptometrix | 7 X 0.5 mL | 473.09 EUR |
NATtrol Influenza Verification Panel (7 x 1.0 mL) |
|||
NATFVP-JAN | Zeptometrix | 7 x 1.0 mL | 569.18 EUR |
NATtrol Zika Virus Range Verification Panel (4 x 0.5 mL) |
|||
NATZIKV-RV | Zeptometrix | 4 x 0.5 mL | 635.33 EUR |
NATtrol Zika Virus (PRVABC59) Range Verification Panel (4 x 0.5 mL) |
|||
NATZIKV(PRV)-RV | Zeptometrix | 4 x 0.5 mL | 635.33 EUR |
NATtrol T.vaginalis Verification Panel (17 x 0.7 mL) |
|||
NATTVGP-C | Zeptometrix | 17 x 0.7 mL | 775.1 EUR |
NATtrol MRSA Panel (4 X 0.5 mL) |
|||
NATMRSAP-C | Zeptometrix | 4 X 0.5 mL | 340.8 EUR |
NATtrol Vaginal Panel (24 x 0.5 mL) |
|||
NATVP-BD | Zeptometrix | 24 x 0.5 mL | 1204.42 EUR |
NATtrol Respiratory Verification Panel (RVP) (20 X 0.6 mL) |
|||
NATRVP-IDI | Zeptometrix | 20 X 0.6 mL | 1020.96 EUR |
NATtrol Clostridium difficile Verification Panel (6 X 1 mL) |
|||
NATCDIVP-C | Zeptometrix | 6 X 1 mL | 639.07 EUR |
NATtrol CARBA-R Verification Panel (10 x 0.06 mL) |
|||
NATCRVP-C | Zeptometrix | 10 x 0.06 mL | 324.58 EUR |
NATtrol MRSA/SA Panel (5 X 0.5 mL) |
|||
NATMRSA/SAP-C | Zeptometrix | 5 X 0.5 mL | 408.19 EUR |
SeroDetect Dengue Fever Verification Panel (10 X 0.5 mL) |
|||
KZMC028 | Zeptometrix | 10 X 0.5 mL | 327.07 EUR |
NATtrol Influenza Verification Panel (18 x 0.5mL) |
|||
NATFVP(XP)-C | Zeptometrix | 18 x 0.5mL | 775.1 EUR |
NATtrol MRSA Verification Panel (6 X 0.5mL) |
|||
NATMRSANP-C | Zeptometrix | 6 X 0.5mL | 478.08 EUR |
NATtrol Respiratory Verification Panel (20 x 0.2mL) |
|||
NATRVP-GMK | Zeptometrix | 20 x 0.2mL | 1221.89 EUR |
NATtrol Respiratory Verification Panel (20 x 0.25mL) |
|||
NATRVP-QIA | Zeptometrix | 20 x 0.25mL | 927.36 EUR |
SeroDetect West Nile Virus Verification Panel (10 X 0.5 mL) |
|||
KZMC027 | Zeptometrix | 10 X 0.5 mL | 334.56 EUR |
NATtrol GI Verification Panel (EA) |
|||
NATGIP-QIA | Zeptometrix | EA | 1002 EUR |
NATtrol Influenza/RSV Verification Panel (21 x 0.5mL) |
|||
NATFRVP-C | Zeptometrix | 21 x 0.5mL | 918.62 EUR |
NATtrol Strep A Verification Panel (24 x 0.1mL) |
|||
NATSAVP1-C | Zeptometrix | 24 x 0.1mL | 758.88 EUR |
NATtrol MTB Verification Panel (5 x 0.6mL, 6 x 1.6mL) |
|||
NATMTBP-C | Zeptometrix | 5 x 0.6mL, 6 x 1.6mL | 666.53 EUR |
NATtrol Respiratory Verification Panel (15 x 0.5mL; 2 x 1mL) |
|||
NATRVP-NNS | Zeptometrix | 15 x 0.5mL; 2 x 1mL | 836.26 EUR |
NATtrol Respiratory Verification Panel 2 (23 x 0.6mL) (Ea) |
|||
NATRVP2-BIO | Zeptometrix | 23 x 0.6mL | 1165.73 EUR |
NATtrol Respiratory Verification Panel 2 (21 x 0.25mL) (EA) |
|||
NATRVP2-QIA | Zeptometrix | 21 x 0.25mL | 881 EUR |
NATtrol Respiratory Verification Panel 2.1 (24 x 0.6mL) (EA) |
|||
NATRVP2.1-BIO | Zeptometrix | 24 x 0.6mL | 1030 EUR |
SeroDetect HBsAg Verification Panel (5 X 1.5 mL) |
|||
KZMC007 | Zeptometrix | 5 X 1.5 mL | 334.56 EUR |
NATtrol EV Panel (20 X 0.2 mL) |
|||
NATEVP-C | Zeptometrix | 20 X 0.2 mL | 721.44 EUR |
HCV Genotype Panel (14 X 0.5 mL) |
|||
KZMC049 | Zeptometrix | 14 X 0.5 mL | 2629.63 EUR |
SeroDetect HIV-Ab Verification Panel (5 X 1.5 mL) |
|||
KZMC006 | Zeptometrix | 5 X 1.5 mL | 334.56 EUR |
SeroDetect Anti-HBs Verification Panel (6 X 1.5 mL) |
|||
KZMC008 | Zeptometrix | 6 X 1.5 mL | 334.56 EUR |
SeroDetect Anti-HBcore Verification Panel (5 X 1.5 mL) |
|||
KZMC009 | Zeptometrix | 5 X 1.5 mL | 334.56 EUR |
SeroDetect Anti-HCV Verification Panel (5 X 1.5 mL) |
|||
KZMC010 | Zeptometrix | 5 X 1.5 mL | 334.56 EUR |
SeroDetect HTLV Ab Verification Panel (5 X 1.5 mL) |
|||
KZMC011 | Zeptometrix | 5 X 1.5 mL | 334.56 EUR |
NATtrol Meningitis/Encephalitis Panel (14 x 0.4 mL) |
|||
NATMEP-BIO | Zeptometrix | 14 x 0.4 mL | 763.87 EUR |
NATtrol BC/GP Panel (10 X 0.75 mL) |
|||
NATBC/GP-NNS | Zeptometrix | 10 X 0.75 mL | 751.39 EUR |
NATtrol BC/GN Panel (12 X 0.75 mL) |
|||
NATBCGN-NNS | Zeptometrix | 12 X 0.75 mL | 871.2 EUR |
NATtrol CT/NG Panel (17 X 1.2 mL) |
|||
NATCT/NGP-C | Zeptometrix | 17 X 1.2 mL | 1048.42 EUR |
NATtrol RSV Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ047 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 278.4 EUR |
NATtrol Norovirus Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ052 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 255.94 EUR |
NATtrol GBS Positive Control (6 x 0.5 mL) |
|||
MDZ053 | Zeptometrix | 6 x 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol GBS Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ054 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol MRSA Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ059 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol SA Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ061 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol GBS Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATLAC-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol MRSA Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATMRSA-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 369.5 EUR |
NATtrol SA Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATMSSA-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 369.5 EUR |
NATtrol Influenza Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATCXVA9-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 278.4 EUR |
NATtrol GBS Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATLAC-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 301 EUR |
NATtrol MRSA Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATMRSA-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 292 EUR |
NATtrol SA Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATMSSA-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 292 EUR |
NATtrol Norovirus Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATROTA-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 195 EUR |
NATtrol RSV Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATRSV-6C-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 216 EUR |
NATtrol GBS Positive Control (6 x 0.5 mL) |
|||
NATSAG-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 x 0.5 mL | 301 EUR |
NATtrol GBS Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATSAG-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol GI Panel (17 x 0.25mL; 2 x 0.85 mL) |
|||
NATGIP-ABC | Zeptometrix | 17 x 0.25mL; 2 x 0.85 mL | 913.63 EUR |
NATtrol GI Panel (22 x 0.25mL; 4 x 0.85 mL) |
|||
NATGIP-BIO | Zeptometrix | 22 x 0.25mL; 4 x 0.85 mL | 1132.03 EUR |
Respiratory Verification Panel (6 X 1.5mL) |
|||
KZMC037 | Zeptometrix | 6 X 1.5mL | 117.41 EUR |
SeroDetect HIV-Ab Range Verification Panel (10 X 1.5 mL) |
|||
KZMC024 | Zeptometrix | 10 X 1.5 mL | 334.56 EUR |
NATtrol Epstein Barr Virus (EBV) Strain: B95-8 (Linearity Panel (6 X 0.5 mL) |
|||
NATEBV-LIN | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 692.74 EUR |
NATtrol Respiratory Pathogen Panel -1 (6 x 0.25 mL) |
|||
NATRPP-1 | Zeptometrix | 6 x 0.25 mL | 557.95 EUR |
NATtrol BK Virus Linearity Panel (6 X 0.25 mL) |
|||
NATBK-LIN | Zeptometrix | 6 X 0.25 mL | 635.33 EUR |
NATtrol Clostridium difficile Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ040 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 388.22 EUR |
NATtrol Clostridium difficile Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ041 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 388.22 EUR |
NATtrol Influenza/RSV Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ045 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 272.16 EUR |
NATtrol Norovirus GI Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ050 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 255.94 EUR |
NATtrol Norovirus GII Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ051 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 255.94 EUR |
NATtrol MRSA/SA Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ060 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol Influenza/RSV Positive Control (6 x 0.5 mL) |
|||
NATFLURSV-6C | Zeptometrix | 6 x 0.5 mL | 272.16 EUR |
NATtrol MRSA/SA Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATMSSE-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 369.5 EUR |
NATtrol Clostridium difficile Positive Control (6 x 0.5 mL) |
|||
NATCDI-6MC | Zeptometrix | 6 x 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol Clostridium difficile Negative Control (6 x 0.5 mL) |
|||
NATCSO-6MC | Zeptometrix | 6 x 0.5 mL | 378.24 EUR |
NATtrol Clostridium difficile Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATCDI-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 301 EUR |
NATtrol Clostridium difficile Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATCSO-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 301 EUR |
NATtrol Influenza/RSV Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATCXVA9-6C-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 201 EUR |
NATtrol MRSA/SA Negative Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATMSSE-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 292 EUR |
NATtrol Pneumonia Panel-Quantifiable Bacteria (17 x 0.2 mL, 3 x 1.2 mL) |
|||
NATPPQ-BIO | Zeptometrix | 17 x 0.2 mL, 3 x 1.2 mL | 863.71 EUR |
Hepatitis E Positive Titer Panel (24 X 0.5 mL) |
|||
KZMC003 | Zeptometrix | 24 X 0.5 mL | 2361.31 EUR |
Influenza Rapid Test Verificaiton Panel (20 X 0.5 mL) |
|||
KZMC021 | Zeptometrix | 20 X 0.5 mL | 334.56 EUR |
HIV 1/2 Rapid Test Verification Panel (10 X 0.25 mL) |
|||
KZMC029 | Zeptometrix | 10 X 0.25 mL | 235.97 EUR |
NATtrol Rotavirus (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATROTA-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 112.42 EUR |
NATtrol BCID Panel (23 x 0.2mL) |
|||
NATBCP-BIO | Zeptometrix | 23 x 0.2mL | 1138.27 EUR |
NATtrol BCID2 Panel (35 x 0.2mL) |
|||
NATBCP2-BIO | Zeptometrix | 35 x 0.2mL | 1108 EUR |
NATtrol Respiratory Validation Panel (RVP) (Qualitative) (13 X 0.2 mL) |
|||
NATRVP-1 | Zeptometrix | 13 X 0.2 mL | 826.27 EUR |
NATtrol Respiratory Validation Panel (RVP) (Qualitative) (17 X 0.2 mL) |
|||
NATRVP-3 | Zeptometrix | 17 X 0.2 mL | 1035.94 EUR |
NATtrol Influenza A/B Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ046 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 272.16 EUR |
NATtrol Norovirus GI/GII Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
MDZ049 | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 255.94 EUR |
NATtrol Influenza A/B Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATFLUA/B-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 278.4 EUR |
NATtrol Influenza A H1N1 Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATFLUAH1N1-6MC | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 278.4 EUR |
NATtrol Influenza A/B Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATFLUAB-6C-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 201 EUR |
NATtrol Norovirus GI/GII Positive Control (6 X 0.5 mL) |
|||
NATNOV-6MC-IVD | Zeptometrix | 6 X 0.5 mL | 195 EUR |
SeroDetect HCV-Ab Mixed Titer Verification Panel I (15 X 0.25 mL) |
|||
KZMC022 | Zeptometrix | 15 X 0.25 mL | 319.58 EUR |
HIV Seroconversion Panel Donor# 65404 (7 X mL) |
|||
HIV9013 | Zeptometrix | 7 X mL | 1858.37 EUR |
NATtrol Pneumonia Panel-Atypical Bacteria & Viruses (12 x 0.2mL, 2 x 1.2 mL) |
|||
NATPPA-BIO | Zeptometrix | 12 x 0.2mL, 2 x 1.2 mL | 625.34 EUR |
NATtrol Escherichia coli (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATECO(933)-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 112.42 EUR |
NATtrol Entamoeba histolytica (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATEHI(DS4)-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 112.42 EUR |
NATtrol Shigella sonnei (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATSSO-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 112.42 EUR |
NATtrol Salmonella typhimurium (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATSTY-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 112.42 EUR |
NATtrol Clostridium difficile (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATCDI-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 112.42 EUR |
NATtrol Campylobacter jejuni (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATCJE-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 112.42 EUR |
NATtrol Escherichia coli (Stool Matrix) (0.5 mL) |
|||
NATECO(ETEC)-GP | Zeptometrix | 0.5 mL | 52 EUR |
statistische Analyse
Probit-Analysen für die Nachweisgrenze mit einer Nachweiswahrscheinlichkeit von 95 % wurden unter Verwendung von SPSS Version 8.0 (IBM, Armonk, NY) durchgeführt. Der Chi-Quadrat-Test wurde mit Microsoft Excel 2013 (Redmond, WA) durchgeführt. P -Werte von 0,05 wurden als statistisch signifikant angesehen. Konfidenzintervalle (CI) wurden unter Verwendung von Graph-Pad (La Jolla, CA) bestimmt.